1、背景

世界卫生组织（WHO）在HPV疫苗指南中提出，评估HPV预防性疫苗免疫保护效果的金标准是假病毒中和抗体检测，该方法已被列入WHO的HPV实验室手册中。其方法灵敏度高，比VLP-ELISA具有更好的型特异性，能检测不同型别的HPV的中和抗体，是目前检测结果与保护效果相关性最好的方法。中科国邦开发的HPV假病毒中和抗体检测方法，对不同报告基因的差异进行了系统的对比，对影响检测各种因素进行了优化验证可以检测二价（HPV16/18）、四价（HPV6/11/16/18）及九价（HPV6/11/16/18/31/33/45/52/58）等各种HPV疫苗涵盖的不同型别HPV病毒的中和抗体水平。

2、原理

HPV假病毒的体外中和试验（PBNA）所使用的假病毒是由HPV基因L1/L2的表达质粒与绿色荧光蛋白（green fluorescence protein，GFP）或红色荧光蛋白（red fluorescent protein，RFP）表达质粒进行共转染至真核细胞而成。病毒感染细胞后，报告基因GFP/RFP瞬时表达，且其表达水平与被感染的假病毒数量成正比，假病毒提前与含不同浓度梯度中和抗体的样品共同孵育，则病毒进入细胞的量会变化。从而可以通过检测GFP/RFP的表达水平来反应中和抗体的水平。

HPV假病毒滴定

3、技术优势

（1）安全：可在BSL-2级实验室操作

（2）直观：荧光蛋白报告基因检测灵敏度高，荧光强度强，可以荧光显微镜下直接进行观察，酶联免疫斑点（Enzyme-linked Immunospot Assay，ELISpot）分析仪可以直接对荧光斑点数进行读取

（3）高通量：多色ELISpot仪可同时读取不同荧光斑点数值，进行双色或三色样本检测，实现高通量筛选，大大缩短研发进程

4、服务详情

5、HPV假病毒

6、相关仪器